(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210919340.9 (22)申请日 2022.08.02 (71)申请人 湖南省儿童医院 （湖南省红十 字会 医院） 地址 410000 湖南省长 沙市雨花区梓园路 86号 (72)发明人 李勇　周海燕　周文虎　王振辉　 (74)专利代理 机构 长沙伊柏专利代理事务所 (普通合伙) 4326 5 专利代理师 丁敏 (51)Int.Cl. A61K 39/39(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐剂及其 制备方法与应用 (57)摘要 本发明提供了一一种用于肿瘤免疫治疗的 锰免疫纳米佐剂及其制备方法与应用， 包括免疫 激动剂， 鞣酸和Mn2+， 鞣酸、 Mn2+与免疫激动剂通 过分子间多重作用力自组装形成锰免疫纳米佐 剂， 纳米佐剂在胞内可 实现pH‑‑谷胱甘肽双重响 应， 释放出免疫激动剂与Mn2+协同激活cGAS ‑‑ STING通路， 锰免疫纳米佐剂中鞣酸、 Mn2+与免疫 激动剂的组成摩尔比为9～15:2～ 5:1， 免疫激动 剂为ADU‑‑S100。 该锰免疫纳米佐剂可向肿瘤细 胞内共递送免疫激动剂和Mn2+， 有效协同激活肿 瘤细胞内cGAS ‑‑STING信号通路， 重塑肿瘤免疫 抑制微环 境， 诱导肿瘤细胞免疫原性死亡； 同时， Mn2+可与免疫激动剂协同激活cGAS ‑‑STING细胞 信号通路， 诱导肿瘤细胞免疫原性死亡， 增强肿 瘤细胞的免疫应答， 协 同显著增强抗肿瘤效果， 应用前景广阔。 权利要求书1页 说明书11页 附图13页 CN 115252773 A 2022.11.01 CN 115252773 A 1.一一种用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐剂， ， 其特征在于， ， 包括免疫激动剂， ， 鞣 酸和Mn2+， ， 所述鞣酸、 、 Mn2+与免疫激动剂通过分子间多重作用力自组装形成纳米佐剂， ， 所 述锰免疫纳米佐 剂中鞣酸、 、 M n2+与免疫激动剂的组成摩尔比为9～～15:: 2～～5::1， ， 所述 免疫激动剂为ADU ‑‑S100， ， 所述锰免疫纳米佐剂在胞内可实现pH ‑‑谷胱甘肽双重 响应， ， 释 放出免疫激动剂与Mn2+协同激活cGAS ‑‑STING通路。 2.根据权利要求1所述的用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐剂， ， 其特征在于， ， 所述锰 免疫纳米佐剂表面 修饰牛血清白蛋白、 、 聚多巴胺、 、 透明质酸中的一 一种或多种。 3.根据权利要 求1所述的用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐剂， ， 其特征在于， ， 所述Mn2 +为可溶性二价锰盐中的一 一种或多种。 4.根据权利要求3所述的用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐剂， ， 其特征在于， ， 所述可 溶性二价锰盐为MnCl2··4H2O。 5.根据权利要求1所述的用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐剂， ， 其特征在于， ， 所述锰 免疫纳米佐剂的粒径为170～ ～230nm， ， 电位 为‑‑10～～‑‑15mV。 。 6.根据权利要求1所述的用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐剂， ， 其特征在于， ， 所述纳 米佐剂为 不规则形态。 7.一一种如权利要求1～～6任一一项所述的用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐剂的 制备方法， ， 其特征在于， ， 包括以下步骤： ： 将免疫 激动剂、 、 鞣酸与M n2+溶于中性缓冲溶液， ， 搅拌自聚， ， 然后将反应溶 液离心清洗即得 锰免疫纳米佐剂。 8.一一种如权利要求1～～6任一一项所述的用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐剂或 如权利要求6所述制备方法制得的用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐剂在制备肿瘤 靶向免 疫纳米药物中的应用。 9.根据权利要求8所述的应用， ， 其特 征性在于， ， 所述肿瘤为 4T1乳腺癌细胞。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115252773 A 2用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐剂及其制备方 法与应用 技术领域 [0001]本发明涉及纳 米材料和纳米生物医药领域， 具体涉及一种用于肿瘤免疫治疗的锰 免疫纳米佐剂及其制备 方法与应用。 背景技术 [0002]免疫治疗是抗肿瘤治疗的新模式， 展现出理想的抗肿瘤效果。 近年来的研究表明， 激活胞质核酸 感受器cGAS ‑STING细胞信号通路在促进肿瘤细胞凋亡、 重塑肿瘤免疫微环 境 中发挥重要作用， 是充满前景的肿瘤免疫治疗药物靶点。 然而， 基于该通路的药物开 发依然 存在瓶颈。 例如， cGAS ‑STING通路的激动剂大多为环二核苷类核酸类似物， 其体内半衰期 短， 血液循环中易降解， 及难以入胞的特性都降低了 抗肿瘤效果。 值 得注意的是， M n2+可通过 直接结合cGAS的方式激活cGAS ‑STING通路， 并能够与免疫激动剂协同促进免疫细胞的活 化、 成熟及抗原的呈递， 发挥理想的抗肿瘤效果。 [0003]专利CN114224905A公开了一种匹多莫德和天然免疫激动剂复合物在制备抗肿瘤 等药物中的应用， 该复合物由匹多莫德与天然免疫激动剂cGAMP及过渡金属离子组成的复 合物， 发挥了单独使用匹多 莫德不具有的抗肿瘤功能， 比单独使用c GAMP具有了显著提高的 抗肿瘤药效作用， 其主要机理是通过匹多莫德来调节机体的免疫功能， 促进机体的免疫反 应； 同时， 利用天然免疫激动剂cGAMP激活cGAS ‑STING通路来提高机体的免疫应答能力。 该 专利仅是将两种不同的组分组合， 各自发挥药效， 分别从两个不同的免疫通路来提高机体 的综合免疫能力； 另外， 该专利还加入了过渡金属(锌或锰)， 但是过渡 金属仅是作为框架材 料， 将匹多莫德与天然免疫激动剂结合形成纳米粒子， 与免疫 治疗效果并无直接影响。 [0004]因此， 设计合理的策略靶向共递送免疫激动剂与Mn2+至肿瘤部位， 是协同增强肿瘤 免疫治疗效果的手段。 设计纳米载体装载免疫激动 剂， 保护其在机体循环过程中免受降解， 提高肿瘤细胞摄取效率可增强肿瘤 免疫治疗效果。 然而， 纳米载体设计的复杂性及环二核 苷类药物分子特殊的理化性质提高了其设计难度。 因此， 亟需一种兼具高载药量与制备简 单的纳米制剂高效递送免疫激动剂， 与M n2+协同增强肿瘤免疫应答， 拓宽肿瘤治疗 类型的手 段。 发明内容 [0005]为解决上述技术问题， 本发明提出了一种用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳 米佐剂及 其制备方 法与应用， 其目 的是通过简单的自组装方式将免疫 激动和Mn2+结合形成纳米粒子， 实现共递送免疫激动剂与Mn2+至肿瘤部位， 免疫激动剂与Mn2+在肿瘤细胞内实现pH ‑谷胱甘 肽双重响应， 协同增强肿瘤免疫应答。 [0006]为了实现上述目的， 本发明首先提供了一种用于肿瘤免疫治疗的锰免疫纳米佐 剂， 包括免疫激动剂， 鞣酸和Mn2+， 所述鞣酸、 Mn2+与免疫激动剂通过分子间多重作用力自组 装形成纳米佐剂， 所述锰免疫纳米佐剂在胞内可实现pH ‑谷胱甘肽双重响应， 释放出免疫激 动剂与Mn2+协同激活cGAS ‑STING通路， 所述锰免疫纳 米佐剂中鞣酸、 Mn2+与免疫激动剂的组说　明　书 1/11 页 3 CN 115252773 A 3