ICS13.310 A 92 GA 中华人民共和国公共安全行业标准 GA/T 195—1998 上海市技术监督情报研究所 登记号|QT994495 中毒检材中甲胺磷的 定性及定量分析方法 Methods of qualitative and quantitative analysis for methanidophos in case samples 1998-12-08发布 1999-03-01实施 中华人民共和国公安部发布 GA/T1951998 前．言 本标准的编制任务由全国刑事技术标准化技术委员会下达，公安部第二研究所负责完成。本标准建 立在《有机磷农药中毒检验研究》课题成果以及全国部分省、市刑事化验人员长期办案的基础上制定而 成。本标准适用于中毒及中毒死亡者呕吐物、吃剩的食物、胃吸出液以及胃、肝、肺、血和胃、肠内容物以 及现场上可疑的物品、液体等的定性及定量分析。 本标准的主要内容：提取净化方法、定性及定量分析方法（GC法、TLC法）和各方法的评价。 本标准经过多年办案实践证明，方法操作简便、定性及定量准确可靠。 本标准由中华人民共和国公安部提出。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：公安部第二研究所。 本标准主要起草人：赵敬真、徐婉。 中华人民共和国公共安全行业标准 中毒检材中甲胺磷的 GA/T195—1998 定性及定量分析方法 Methods of qualitative and quantitative analysis for methanidophos in case samples 1范围 本标准规定了中毒检材中甲胺磷的定性及定量分析方法。 本标准适用于中毒者的呕吐物、吃剩的食物、胃吸出液以及中毒死亡者的胃内容物、胃组织、十二指 肠内容物、血液、肺、肝以及注射部位肌肉等检材中甲胺磷的定性及定量分析。 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GA/T101一1995中毒检材中有机磷农药的定性定量分析方法 GA/T122—1995 5毒物分析名词术语 3定义 本标准采用GA/T122中的定义。 第一篇气相色谱法（GC法） 4原理 本方法采用添加标准品进行对照分析的气相色谱法定性、定量分析检材中的农药。即检材与添加到 空白检材中的阳性对照和阴性对照，同时经过提取净化及浓缩至一定体积后，用火焰光度检测器或氮磷 检测器的气相色谱法进行检测，与标准品比对，以保留时间作为定性依据；与平行操作的阳性对照比较， 以峰面积值（或峰高值）为依据，用外标法计算各检材中的农药含量。 5试剂(所用试剂均为分析纯） 5.1溶剂 氟仿、二氮甲烷、丙酮、乙醚、石油醚、甲醇、乙醇等。 5.2吸附剂 5.2.1活性炭：层析用颗粒状，直径0.43mm或20~40目。 活性炭的处理：市售层析用活性炭（20～40目）加浓盐酸浸没表层，玻璃棒轻轻捣拌，然后于80～ 90℃温度下加热1h，冷却后倾去多余的酸液；活性炭用蒸馏水洗到中性后，用甲醇浸洗二次，挥去甲 中华人民共和国公安部1998-12-08批准 1999-03-01实施 1 查标准上建标网wwwiz321.net GA/T195—1998 醇，然后再置100℃烘箱中烘烤3～4h，取出置干燥器中保存备用。 5.2.2中性层析氧化铝：市售100200目的中性层析氧化铝于130℃下活化3h，冷却后按6%比例加 水，搅拌均匀后放回瓶内，24h后保存备用。 5.3试剂 5.3.1酸类：冰乙酸或36%醋酸、浓盐酸。 5.3.2脱水剂：无水硫酸钠。 5.3.3其他试剂：氢氧化钠等。 5.4农药标准溶液 5.4.1甲胺磷标准储备液：精确称取甲胺磷纯品一定量装于小烧杯中，用少量多次的90%～95%乙醇 溶解到容量瓶中；然后再加同样的溶剂稀释到刻度，配制成10.00mg/mL的标准储备液，置于冰箱中 一10℃下保存（使用期1a）。 5.4.21.00mg/mL甲胺磷标准液：取上述标准储备液1mL，用无水乙醇稀释至10mL，得 1.00mg/mL甲胺磷的标准液置4℃下冰箱保存（供TLC法及添加提取用），使用期60d。 5.4.3供GC用的甲胺磷使用液：取1.00mg/mL标准液一定量，稀释1020倍，供GC分析用，临用 时新配。稀释的浓度根据仪器状态及所用检测器的灵敏度而定。 6仪器与器材 6.1# 带有火焰光度检测器或氮磷检测器的气相色谱仪（GC/FPD或GC/NPD)。 6.2包 色谱数据微处理机。 6.3多用振荡器。 6.4浓缩装置：K.D浓缩器或其他浓缩装置。 6.5微量注射器：10μL、50μL、100μL。 6.6实验室常用玻璃器材。 7提取净化方法 7.1方法1 中性氧化铝净化法，本方法适用于胃、肝等组织及其内容物等新鲜检材的提取净化。 7.1.1提取 取绞碎的胃、肝组织及胃内容物等检材5~10g，于蒸发血中加无水硫酸钠研成沙状；转移至100~ 200mL具塞三角烧瓶中，加无水乙醇或甲醇一二甲烷混合溶剂（1：2)淹没（约40mL），浸泡0.5h 后振摇提取15min；分出提取液，残渣再重复操作2次，合并提取液浓缩至2～5mL，待净化。 7.1.2装柱 取内径1～2cm的直形玻璃净化柱，从下往上依次装人：少许脱脂棉花轻塞下口、1～2g无水硫酸 钠、5~10g中性层析氧化铝、5~10g无水硫酸钠，然后用提取溶剂预淋柱子备用。 7.1.3净化及浓缩 将检材的浓缩液中加人等体积的二氯甲烷，混匀后，倒入柱上；待检液流完后，再用50mL的无水 乙醇一二氟甲烷液（1：2)淋洗，收集洗脱液，浓缩至0.5mL供检。 7.2方法2 活性炭富集法，本方法适用于水、饮料等液体检材中微量甲胺磷的提取。 7.2.1直接富集法提取甲胺磷 取30～50mL水、饮料等检材装于烧杯中，加0.5g活性炭，玻璃棒捣拌2～3min，或者装于具塞三 角烧瓶中振摇2～3min。然后滤纸过滤，弃去滤液，取下滤纸和活性炭一并于玻璃研钵中；加无水硫酸 钠，充分研磨脱水，转移至具塞三角烧瓶中；用二氯甲烷15mL提取2次，每次振摇15min，合并两次提 查标准上建标网wwwiz321.net GA/T 195-1998 取液，加2mL无水乙醇于提取液中，浓缩至0.5mL供检。 7.2.2柱吸附富集法提取甲胺磷 7.2.2.1净化柱的制备：取内径1cm的直管玻璃柱，用少许脱脂棉轻轻塞住下口；然后装入5g左右 的活性炭，再用少许脱脂棉覆盖活性炭备用。 7.2.2.2将含微量甲胺磷的水、饮料等检液100mL，分多次倒入柱中，检液通过柱子的流速 1～2mL/min，匀速过柱；检液全部通过柱子之后，用洗耳球挤去柱中剩余水份。 7.2.2.3洗脱：往柱子中逐次倒人70～80mL的二氯甲烷洗脱，溶剂倒入柱子后，先浸泡510min后 再洗脱，二氯甲烷的流速为2～3mL/min；收集洗脱液用少许无水硫酸钠脱水，加人2mL的无水乙醇 于洗脱液中，浓缩至0.5mL供检。 7.3方法3 液一液浸提法，本方法适用于各种检材的提取净化。 7.3.1胃、肝等组织及胃、肠内容物的提取净化 取绞碎的检材5～10g，装于具塞三角烧瓶中，加20mL丙酮浸提2～3次，每次振提30min；提取 液过滤于蒸发血中，60℃温度下，挥去溶剂至近干，然后加石油醚适量搅拌洗涤2次，每次10～20mL （主要看油脂含量多少而定），吸去上层石油醚弃去。残渣中再加氯仿20mL，同时加无水硫酸钠脱水揽 拌至氮仿层清亮，移人具塞三角瓶中，振摇20min，分出氛仿液；残渣再加20mL氮仿振提1次，合并两 次氮仿提出液，加入2mL无水乙醇或乙酸乙酯，70℃下浓缩至0.5mL备检。 7.3.2油脂检材的提取 取动植物油样检材5~10g，加10~20mL水，水浴上温热使油脂完全溶化，转移到50~100mL分 液漏斗中；加石油醚反复振提至水层清亮，弃去石油醚层，水液再转移到200mL蒸发皿中，水浴上挥发 水分至近干；放冷后，加无水硫酸钠研磨成沙状，转移至100mL具塞三角烧瓶中，用30mL氟仿分次洗 涤蒸发血，氯仿液倒入三角烧瓶中振摇提取20min，分出氯仿液；残渣中再加氮仿30mL提取1次，合 并氟仿提取液，加1～2mL无水乙醇或乙酸乙酯，70℃下浓缩至0.5mL供检。 7.4方法的提取回收率如表1所示。 表 1 提取方法 回收率 方法1 75%~88% 方法2 65%~80% 方法3 70%~82% 8气相色谱定性分析 8.1定性试验样品的制备 8.1.1取检材（肝：胃及内容物等）各5～10g，液体样品30～50mL各一份，另取相应的空白检材等量 二份，其中一份添加10～100μg甲胺磷标准，作为阳性对照；另一份作为阴性对照。 8.1.2上述各试样选择第7章中适当的提取净化方法进行处理，最后得各试样提取浓缩的溶液0.5~ 1mL供分析。 8.2气相色谱条件（参考数据） 8.2.1色谱法 5%QF-1Chromosorb WHP80~100目2m×3mm(id)玻璃填充柱； 5%OV-17Gaschrom Q80~100目+10%DC-200GaschromQ80~100目(1：1) 混装2mX3mm(id)玻璃填充柱； 5%QF-1GaschromQ80~100目+5%DC-200GasChromosorbWHP80~100 3 查标准上建标网wwwiz321.net GA/T 195—1998 目（1：1)混装2m×3mm(id）玻璃填充柱； 30%Reoplex400Chro